【肾穿小卖部】十二时辰之暗夜歧路

       冰冻切片进入荧光染料染色过程，荧光制片有点像撒豆成兵的过程，往冰冻切片上撒下黄豆、黑豆、红豆和绿豆等不同的豆子，这些豆子官方称呼“抗体”。这些豆子们能否在冰冻切片上发光，向组织发回信号，取决于肾脏新鲜组织里有无对应“抗原”。抗原抗体的结合就是一把钥匙对应一把锁，不同的豆子能开不同的锁，那些隐藏的病变抗原就无所遁形了。而抗原们也有自身的躲藏方式，豆子们揪出这些抗原后就呆在原地，抗原抗体锁死一动不动，有时它们会抱团成团块状荧光，有时它们又会散落满天星，分散成颗粒状荧光。不同品类豆子的发光方式可以帮助病理医生的诊断，此处科普一下荧光染料里的大佬，IgG和IgA这两个抗体，它们的阳性于否及阳性方式直接决定诊断结果。
       未时一过，肾穿荧光切片新鲜出炉。早已守候多时的我们全冲进了荧光室，在黑暗的荧光室里，一双双急切的眼睛好像暗夜里的星辰，闪闪发光。在诊断组气氛被拉得高高的瞬间，几乎全部阴性的结果给火热的期待气氛浇了盆冷水。此刻我们得到的结果是，IgG呈现一种无比丝滑的线状阳性，无明确指向意义，糖尿病、高血压甚至血管损伤都会出现IgG线状阳性。而IgA的阳性更为尴尬，它只是出现了极少的点状阳性，纯属可有可无。这种诡异的荧光阳性组合，让肾穿的初步诊断走向歧途。

       新月体肾炎分为三型，IgA的阳性我们会归入Ⅱ型，即免疫复合物所致新月体肾炎，而荧光全阴我们会归入Ⅲ型，即寡免疫复合物性新月体肾炎。而IgA的少量阳性，究竟算有意义还是无临床意义呢？荧光结果最终没能给临床一个初步的答案，那么肾穿常规组织便成为全村的希望。
       酉时—寅时，肾穿组织进入了脱水机，在漫长的一夜长达4个时辰的脱水之后，它们会变成技术员可以切片的蜡块。所谓脱水，字面意思就是将肾穿组织里面的水分挤出来，这样的脱水过程就是一个用酒精、二甲苯等有机溶剂置换水分的过程。在组织中的水分全部被有机溶剂置换出去后，石蜡油登场了，石蜡油是可以融掉并替换掉有机溶剂的。这就是为什么组织要进行脱水的原因，石蜡无法溶于水，有机溶剂成为组织水分和石蜡之间最好的中间商。石蜡呈油状的液体形态时，可以把形态像脱水蔬菜般的肾穿组织摁进石蜡油中，如果诊断需要的话，甚至可立可卧的凹出各种造型。之后降温冷却，石蜡油便凝固了，成了一块块可用于切片的石蜡块。这个时候的石蜡块硬度显然是不够的，它需要放置在冰冷的冻台上冻得邦邦硬，这时技术员眼中一块切相上佳的石蜡块才算真正成型了。切肾穿组织不同于其它组织，常规组织的切片厚度一般是5μm，而肾穿组织必须达到令人发指的2μm，它必须足够的轻薄才能够满足日常诊断。
       当石蜡切片制作完毕的时候，肾穿时辰已经过去了十个时辰，你以为制片完成就万事大吉了吗？非也，它是另外一个深坑的开始，却也是新的突破希望，且听下回分解……

■黄思念